體外哺乳動物細胞基因突變試驗儀

瀏覽次數：502更新日期：2025-05-06

　　體外哺乳動物細胞基因突變試驗儀

　　一、 儀器介紹

　　實驗目的：

　　本試驗用于檢測受試物對體外培養的哺乳動物細胞的基因突變作用,包括堿基對突變、移碼突變和缺失等,從而評價受試物引起突變的可能性

　　應用范圍

　　應用于科研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域

　　符合標準：

　　GB/T 15670.20-2017《農藥登記毒理學試驗方法第20部分:體外哺乳動物細胞基因突變試驗》

　　二、試驗流程

　　1）細胞培養:

　　選擇合適細胞系(如L5178Y、CHO)，常規傳代培養

　　2）受試物處理:

　　暴露于不同濃度受試物(需設陰性/陽性對照)

　　3）表達期:

　　預留足夠時間(通常7-10天)使突變表型顯現。

　　4.）突變體篩選:

　　TK試驗:使用篩選TK突變體。

　　HPRT試驗:選HPRT突變體。

　　5）克隆形成分析:

　　計數突變集落，計算突變頻率(突變集落數/存活細胞數)

　　6）數據統計:

　　與對照組比較，判斷突變率是否顯著增加。

　　三、注意事項

　　1）細胞活力控制:受試物濃度需保證細胞存活率(通常>50%)

　　2）代謝活化系統:需加入S9混合物(模擬體內代謝，(如Aroclor 1254誘導的大鼠肝S9)。

　　3）假陽性/陰性:避免pH、滲透壓等非特異性因素干擾。

　　4）合規性: 遵循國際指南(如OECD 490、ICH S2R1)。